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Cellartis iPS向血管內(nèi)皮細(xì)胞定向分化培養(yǎng)的培養(yǎng)要求及方法

更新時(shí)間:2024-01-19

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CellartisiPS細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞定向分化的培養(yǎng)要求及方法如下:  
培養(yǎng)基準(zhǔn)備:  
血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基:使用高質(zhì)量的無血清iPSC培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基。  
定向分化因子添加物:添加特定的生長因子和信號(hào)通路激動(dòng)劑,如BMP4、ActivinA、bFGF等。  
iPSC預(yù)處理:  
擴(kuò)增iPSC:將iPSC在6孔板上進(jìn)行擴(kuò)增至適當(dāng)數(shù)量,并確保其處于良好的生長狀態(tài)。  
預(yù)處理細(xì)胞:在預(yù)處理之前,應(yīng)將iPSC從無血清培養(yǎng)條件中轉(zhuǎn)移到有血清或低濃度因素(例如ActivinA)的培養(yǎng)條件中。  
向血管內(nèi)皮細(xì)胞定向分化:  
洗滌和收獲:將預(yù)處理的iPSC用PBS洗滌后,加入含有特定分化因子和激動(dòng)劑的新鮮補(bǔ)給液。  
分化過程控制:根據(jù)具體方案,在不同時(shí)間點(diǎn)以不同方式對(duì)細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)。可能需要調(diào)整各種因素,如濃度、時(shí)間和順序等。  
收獲細(xì)胞:根據(jù)所需的分化程度和時(shí)間,收獲相應(yīng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞。  
血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng):  
培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換:將收獲的血管內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)移到血管內(nèi)皮細(xì)胞特定的培養(yǎng)基中。常用的培養(yǎng)基包括EndothelialCellGrowthMedium(EGM)。  
經(jīng)常更換培養(yǎng)基:每隔2-3天更換一次新鮮的培養(yǎng)基,以保持適宜的營養(yǎng)供應(yīng)和環(huán)境條件。  
貼壁培養(yǎng):將血管內(nèi)皮細(xì)胞接種在貼壁組織培養(yǎng)器皿上,如6孔板或96孔板,并確保其附著并擴(kuò)增。  
請(qǐng)注意,在進(jìn)行任何實(shí)驗(yàn)操作之前,請(qǐng)參考Cellartis提供的詳細(xì)實(shí)驗(yàn)方案和技術(shù)資料,并按照相關(guān)安全規(guī)范操作。
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